上一篇推文中，J博士向大家介绍了用于评估Cre表达情况的荧光报告品系。本期将继续介绍Cre工具鼠的另一个应用方向：条件性细胞剔除。此方法多用于研究特定细胞类群的功能，利用白喉毒素 (Diphtheria toxin, DT) 及其细胞表面的白喉毒素受体 (DT receptor, DTR) ，阻断细胞蛋白质的合成，最终导致细胞死亡。

 

在自然界中，DTR只在灵长类 (比如人，猴等) 动物中表达，而小鼠等啮齿类动物则由于没有DTR而对白喉毒素具有抵抗力。因此，要实现特异性剔除一类细胞，需要先通过基因修饰技术使小鼠条件性表达DTA (DT subunit alpha gene) 或DTR，再配合Cre品系共同使用。常用的方法有以下两种：

 

一种是将表达DTA的flox小鼠与Cre小鼠进行配繁，在特定细胞中直接表达DTA，进而实现细胞的特异性剔除。

图 1 品系#026033构建原理

与Cre品系配繁后去除eGFP和STOP序列，表达DTA直接介导细胞特异性剔除（PMID: 22745251）

 

另一种是将表达DTR的flox小鼠与Cre小鼠进行配繁，在需要的时期对小鼠注射白喉毒素，实现特定时间、特定细胞的剔除。

图 2 DTR介导细胞剔除的原理（PMID: 15908920）

下表列出了JAX的一些通用型DTA/DTR小鼠品系，有些品系也同时表达荧光蛋白，可以通过荧光信号判断细胞中DTR的表达情况和细胞剔除效果。

 

上述品系在使用时需要与组织/细胞特异性Cre小鼠进行配繁，这在一定程度上延长了研究所需时间。JAX也拥有一些特定启动子驱动表达DTR的品系，研究者可以在感兴趣的发育时间直接对小鼠注射白喉毒素，实现特定细胞的剔除，为研究节省时间。

 

下表列出了JAX可提供的表达DTA或DTR的一些活体品系：