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B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/3J
品系货号：006494 ｜ 通用名称：B6CBA-R6/2 (CAG 120 +/- 5)
RRID:IMSR_JAX:006494
此转基因小鼠品系表现出进行性神经系统疾病表型，可模拟人亨廷顿舞蹈症 (Huntington's disease, HD) 的多种特征，包括舞蹈症样运动、不自主刻板运动、震颤和癫痫发作，以及异常发声等非运动障碍。 整个病程期间会出现尿频以及体重减轻和肌肉萎缩。 神经系统疾病的发病涉及神经元核内包涵体，其中包含亨廷顿蛋白和泛素蛋白。 此转基因品系携带5' 端包含约120±5个CAG重复序列扩展的人HD基因。
重要提示：杰克森实验室筛选/选择Pde6b基因位点野生型（即不携带CBA/J来源的Pde6brd1等位基因）进行转基因种群繁育。 但由于此品系的维持方法是在每一代将R6/2转基因Pde6b+/+动物与B6CBAF1杂交系交配，因此部分后代为Pde6brd1的杂合子。 此外，这些动物的后代中的其他C57BL/6J或CBA/J特异性突变（例如，NntC57BL/6J等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。
2007年1月：品系名称和表型变更。更多信息请参见“品系建立”。
品系特点
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转基因
品系捐赠者 Gillian Bates - University College London, Institute of Neurology
品系详情
此转基因品系所携带的人HD基因5'端包含近120±5个CAG重复序列扩展。 该转基因广泛表达。 此转基因小鼠品系表现出进行性神经系统疾病表型，可模拟HD的多种特征，包括舞蹈症样运动、不自主刻板运动、震颤和癫痫发作，以及异常发声等非运动障碍。 这些小鼠在整个病程期间会出现尿频以及体重减轻和肌肉减少。 此外，这些小鼠会产生包含亨廷顿蛋白和泛素蛋白的神经元核内包涵体 (Neuronal Intranuclear Inclusion, NII)。 上述NII现已在人HD患者体内发现，这一点过去未得到确认。 据报道，HD症状的发病年龄介于9~11周之间。 此小鼠通常称为“R6/2”品系。
转基因小鼠在12周龄时出现高血糖症，并伴随胰岛素水平的相应降低。 胰岛β细胞内的亨廷顿蛋白包涵体最早出现在7周龄时，在12周龄时95%以上的β细胞均已出现包涵体。 在12周龄时，胰岛α和δ细胞（分别为24%和6%的细胞）也出现了一些包涵体。 在12周龄时，胰岛变为低渗状态，并且β细胞数量大幅减少。 β细胞内几乎没有胰岛素分泌囊泡。 (Bjorkquvist M., et al. 2005)
CAG重复序列监测：
R6/2转基因小鼠的CAG重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。 为确保品系货号002810和006494小鼠的CAG区域保持稳定，杰克森实验室测定了每只转基因携带动物的CAG重复序列区域长度。 更多信息请参见下方的“R6/2 转基因小鼠品系基本信息”。
Pde6b等位基因监测：
杰克森实验室筛选/选择Pde6b基因位点野生型（即不携带CBA/J来源的Pde6brd1等位基因）进行转基因种群繁育。 但由于此品系的维持方法是在每一代将R6/2转基因 Pde6b+/+动物与B6CBAF1杂交系交配，因此部分后代为Pde6brd1的杂合子。 此外，这些动物的后代中的其他C57BL/6J或CBA/J特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。
HDexon1转基因在基因组中的位置和拷贝数：
HDexon1转基因的作用方式是单个拷贝插入。 序列分析结果表明，其插入点位于小鼠4号染色体上预测基因Gm12695的内含子中 (chr4:96,409,585-96,414,930 [assembly NCBI 37/mus musuculus 9])，并且该转基因的侧翼是两段不包含编码DNA完整1号外显子的重排序列 (Cowin et al. 2011 PLoS ONE 6(12):e28409)。 此外，一个革兰氏阳性细菌序列片段（可能来自克隆载体污染）插入到能够驱动完整拷贝表达的HTT启动子的上游。 转基因插入片段还导致整合位点附近的小鼠染色体DNA出现5.4kbp的缺失 (Chiang et al. 2012 Nat Genet. 44(4):390-7)。 截至2017年1月，预测基因Gm12695的功能未知。 该基因在小鼠大脑中的表达水平通常可以忽略。 转基因插入片段（在 Gm12695 转录的反义方向）让Gm12695的部分片段（8-11 号外显子）在皮层中的表达增加 - 并且现已证明此转录本在与 R6/2 模型相关的广泛的差异表达基因网络（包括调控突触传递、细胞信号转导和转录的基因）中大量表达 (Jacobsen et al. 2017 Sci Rep. 7:41120)。
此品系小鼠在运输时贴有JAXTagTM 耳标。
R6/2转基因小鼠品系的基本信息：
此R6/2转基因小鼠品系表达带有不同长度CAG重复序列扩展的人HTT基因的5’端。 此CAG重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。 R6/2动物的表型随着CAG重复序列长度而显著改变，并且与人类中的观察结果类似，在此转基因通过父系遗传传递时，R6/2转基因小鼠中CAG重复序列扩展的发生率更高。 有趣的是，在R6/2小鼠中，拷贝-表型关系不呈线性，而且更多的CAG重复也未必导致发病提前和更严重的表型。 遗传背景可能也会导致疾病严重程度/进展出现差异。
如果使用的是CAG重复序列长度不稳定的品系，则强烈建议测定全部实验动物的CAG重复序列数 - 所有实验组中的全部动物均应携带类似长度的CAG重复序列。 应采用高分辨率方法测定HD小鼠CAG重复序列的长度，而琼脂糖凝胶电泳类分析的分辨率通常不足以准确测定CAG重复序列数。
品系建立
此转基因是约1kb的人HD基因，包含启动子区域，带有120±5个CAG重复序列的1号外显子。 此品系在原始文献中的名称为R6-2品系。
2006年秋季，B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/1J种群的转基因出现CAG重复序列单元数减少（约100-105个CAG重复序列），并且伴随着预期的神经系统疾病表型严重程度降低和发病延迟。 储备库于2006到2007年之间的冬天复苏了HDexon1品系的冷冻胚胎。 胚胎复苏品系的 CAG重复序列数约为160±10，HD症状的发病时间为9-11周龄，与此品系最初报道的时间相同。
此胚胎复苏品系继续作为B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/1J（品系货号 002810）使用。 表型发生变化的品系（之前品系货号为002810）现命名为B6CBA-Tg(HDexon1)62Gpb/3J（品系货号 006494），并且CAG重复序列数维持在120±5个。
CAG重复序列监测：
R6/2转基因小鼠的CAG重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。 为确保品系货号002810和006494小鼠的CAG区域保持稳定，杰克森实验室测定了每只转基因携带动物的CAG重复序列区域长度。 更多信息请参见下方“品系详情”中的“R6/2转基因小鼠品系基本信息”。
Pde6b等位基因监测：
杰克森实验室筛选/选择Pde6b基因位点野生型（即不携带CBA/J来源的Pde6brd1等位基因）进行转基因种群繁育。 但由于此品系的维持方法是在每一代将R6/2转基因Pde6b+/+动物与B6CBAF1杂交系交配，因此部分后代为Pde6brd1的杂合子。 此外，这些动物的后代中的其他 C57BL/6J或CBA/J特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。
HDexon1转基因在基因组中的位置和拷贝数：
HDexon1转基因的作用方式是单个拷贝插入。 序列分析结果表明，其插入点位于小鼠4号染色体上预测基因Gm12695的内含子中 (chr4:96,409,585-96,414,930 [assembly NCBI 37/mus musuculus 9])，并且该转基因的侧翼是两段不包含编码DNA完整1号外显子的重排序列 (Cowin et al. 2011 PLoS ONE 6(12):e28409)。 此外，一个革兰氏阳性细菌序列片段（可能来自克隆载体污染）插入到能够驱动完整拷贝表达的HTT启动子的上游。 转基因插入片段还导致整合位点附近的小鼠染色体DNA出现5.4kbp的缺失 (Chiang et al. 2012 Nat Genet. 44(4):390-7)。 截至2017年1月，预测基因Gm12695的功能未知。 该基因在小鼠大脑中的表达水平通常可以忽略。 转基因插入片段（在Gm12695转录的反义方向）让Gm12695的部分片段（8-11号外显子）在皮层中的表达增加 - 并且现已证明此转录本在与R6/2模型相关的广泛的差异表达基因网（包括调控突触传递、细胞信号转导和转录）中大量表达 (Jacobsen et al. 2017 Sci Rep. 7:41120)。
参考文献
精选参考文献
在文献发表时若用到该小鼠品系，请引用原文，并在文章的材料与方法部分注明JAX品系号006494。
2017
Mutant Huntingtin Disrupts the Nuclear Pore Complex.
Grima JC , et al.
2012
Systematic behavioral evaluation of Huntington's disease transgenic and knock-in mouse models.
Cummings DM , et al.
2009
Systematic behavioral evaluation of Huntington's disease transgenic and knock-in mouse models.
Menalled L , et al.
1996
Exon 1 of the HD gene with an expanded CAG repeat is sufficient to cause a progressive neurological phenotype in transgenic mice.
Mangiarini L , et al.
健康报告 屏障设施级别描述 >
育种须知 更多繁育和饲养支持 >
起初，人们认为半合雌性小鼠无生育能力。 但杰克森实验室的实验证实，半合雌性小鼠有生育能力，只不过因发病而无法照顾其幼崽。 半合雌性小鼠的卵巢功能正常。 [2022年4月]
半合雄性小鼠的繁育窗口为3-4周，因此交配计划中应设置多只雌性小鼠。 尽管半合雄性小鼠的原始描述为大约仅半数具有生育能力，但杰克森实验室内的繁育经验证实，半合雄性小鼠在这3-4周的繁育窗口期间具有正常的生育力 [2022年4月]。
交配方案为B6CBAF1雌性小鼠X半合HD62雄性小鼠，理想设置是 两雌一雄（2只B6CBAF1雌性小鼠和1只半合雄性小鼠）。 目前此品系的维持方法是卵巢移植半合雌性小鼠x B6CBAF1/J雄性小鼠。 两种交配方案可供客户选择，其中更推荐卵巢移植半合雌性小鼠x B6CBAF1/J交配方式。
CAG重复序列监测：
R6/2转基因小鼠的CAG重复序列数量受生殖细胞/体细胞不稳定性的影响，可能增加或减少。 为确保品系货号002810和006494小鼠的CAG区域保持稳定，杰克森实验室测定了每只转基因携带动物的CAG重复序列区域长度。 更多信息请参见下方“品系详情”中的“R6/2转基因小鼠品系基本信息”。
Pde6b等位基因监测：
杰克森实验室筛选/选择Pde6b基因位点野生型（即不携带CBA/J来源的Pde6brd1等位基因）进行转基因种群繁育。 但由于此品系的维持方法是在每一代 R6/2转基因Pde6b+/+动物与B6CBAF1杂交系交配，因此部分后代为Pde6brd1的杂合子。 此外，这些动物的后代中的其他C57BL/6J或CBA/J特异性突变（例如，NntC57BL/6J 等）在基因型方面均有可能是杂合子、纯合子或野生型。
预期通过育种获得的被毛颜色为黑色和野鼠色。
销售和使用条款
006494
B6CBA-R6/2 (CAG 120 +/- 5)
亨廷顿舞蹈症
参考文献|
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精选参考文献在文献发表时若用到该小鼠品系，请引用原文，并在文章的材料与方法部分注明JAX品系号006494。
2017Mutant Huntingtin Disrupts the Nuclear Pore Complex.
Grima JC , et al.
2012A critical window of CAG repeat-length correlates with phenotype severity in the R6/2 mouse model of Huntington's disease.
Cummings DM , et al.
2009Systematic behavioral evaluation of Huntington's disease transgenic and knock-in mouse models.
Menalled L , et al.
1996Exon 1 of the HD gene with an expanded CAG repeat is sufficient to cause a progressive neurological phenotype in transgenic mice.
Mangiarini L , et al. -
其它参考文献
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